抗體藥物及重組蛋白等已經(jīng)被廣泛應(yīng)用于治療方面，因此蛋白質(zhì)差異性的品質(zhì)管理工作極其重要，因?yàn)檫@些物質(zhì)的聚合物、變性物質(zhì)等都有可能導(dǎo)致過(guò)敏性休克或免疫反應(yīng)。高效液相色譜法（HPLC）可以對(duì)抗體藥物以及重組蛋白等蛋白藥物的不均一性進(jìn)行有效的分析，尤其當(dāng)多種色譜分析方法有效組合時(shí)，可以更好對(duì)蛋白藥物進(jìn)行定量和定性分析，除此還可使用分析檢測(cè)方法有等電聚焦電泳、氨基酸序列分析、MALDI-TPF MS、CD Spectrum 分析及 NMR 分析。

蛋白藥物的不均一性（差異性）?

?

翻譯后的修飾（酶的作用等）:?

磷酸化（脫磷酸化）、糖基化、脂質(zhì)化、甲基化、乙酰化、多肽部分的酶切等。

降解（酶的作用及非酶的作用） :

蛋白酶的酶解、脫酰胺、氧化等。

?

其他:

化學(xué)修飾（PEG 化等）、變性、聚合等

抗體異構(gòu)體出現(xiàn)的原因:

氨基酸序列的不同（重組、轉(zhuǎn)錄異常）

氧化（Met，Trp）,C 末端 Lys 的分解，N 末端焦谷氨酸（Glu）,脫酰胺

化（Asn）。

二硫鍵結(jié)合的有無(wú)及 S-S 結(jié)合力的不同。

復(fù)合糖鏈的不同。

?

抗體異構(gòu)體對(duì)藥物性能的影響:

免疫抑制效果

Fc 效應(yīng)功能

發(fā)燒等副作用

溶解性及保存穩(wěn)定性（分解性）

?

色譜分析分離模式

1、尺寸排阻色譜法（SEC）

依據(jù)組分分子空間尺寸大小進(jìn)行分離，主要用于多聚體、降解片段，PEG

化修飾蛋白等樣品的分析。?